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科學

比爾－朗伯定律吸光度計算機

比爾－朗伯定律（Beer–Lambert law）描述單色光通過稀薄溶液時，吸光度同濃度、光徑長度成正比。揀返要求嘅變數，輸入其餘三個即可一鍵反算，仲會即時顯示透光率 T = 10⁻ᴬ。

計算結果

—

透光率 T — T = 10⁻ᴬ；A = 1 時透光 10%、A = 2 時透光 1%。

公式

A = ε × c × ℓ

A 無單位；ε 用 M⁻¹·cm⁻¹（mol⁻¹·L·cm⁻¹）；c 用 M（mol/L）；ℓ 用 cm（標準比色管 1 cm）。

公式

A = ε × c × ℓ ； T = 10⁻ᴬ

常見問題

吸光度同透光率有咩分別？

透光率 T = I / I₀ 係樣品讓多少光通過嘅比例（0 至 1，或 0 % 至 100 %）。吸光度 A = −log₁₀ T，係 T 取對數後嘅倒數，方便用嚟同濃度做線性關係。例如 T = 10 % ⇔ A = 1；T = 1 % ⇔ A = 2。

莫耳吸光係數 ε 點樣得到？

ε 同波長、溶劑、pH 都有關，通常喺文獻或化學品 datasheet 用「ε₂₈₀」或「ε at λmax」嘅形式列出。常見例子：NADH 喺 340 nm 嘅 ε ≈ 6 220 M⁻¹·cm⁻¹；色氨酸喺 280 nm 約 5 500 M⁻¹·cm⁻¹。冇文獻值時可以做標準曲線（已知濃度 → 量 A）然後用斜率反算 ε。

我嘅讀數 A 大過 2，點解結果可能唔準？

A 大過 ~2 嘅時候，儀器探測器收到嘅光剩低 < 1 %，雜散光（stray light）就成為相對較大嘅誤差，加上高濃度時分子可能聚合或變色，呢啲都會令 A vs c 偏離直線。對應做法係稀釋樣品（例如稀 10 倍），等讀數落入 A = 0.1–1 嘅理想範圍，再用稀釋倍數回算原濃度。

可唔可以用 mM 或 µM 直接輸入？

本計算器嘅 c 一定要用 M（mol/L）：1 mM = 1 × 10⁻³ M、1 µM = 1 × 10⁻⁶ M、1 nM = 1 × 10⁻⁹ M。例如「50 µM」要輸入「0.00005」或者用科學記號「5e-5」。同樣道理，ε 需要係 M⁻¹·cm⁻¹（即 L·mol⁻¹·cm⁻¹）。

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